Гель электрофорез хийхдээ хязгаарлах ферментийг хэрхэн ашигладаг вэ?
Гель электрофорез хийхдээ хязгаарлах ферментийг хэрхэн ашигладаг вэ?

Видео: Гель электрофорез хийхдээ хязгаарлах ферментийг хэрхэн ашигладаг вэ?

Видео: Гель электрофорез хийхдээ хязгаарлах ферментийг хэрхэн ашигладаг вэ?
Видео: Электрофорез в геле (видео 3) | Генная инженерия |Молекулярная генетика 2024, Арванхоёрдугаар сар
Anonim

1 Хариулт. ДНХ, РНХ эсвэл плазмидыг таслахын тулд хязгаарлалт сайтууд (EcoRI, BamHI, hindIII болон BglII гэх мэт) жижиг генетикийн хэсгүүдийг бий болгож, тэдгээрийг салгаж, тодорхойлогддог. гель электрофорез.

Үүнтэй адилаар хязгаарлалтын ферментийн үүрэг юу вэ?

А хязгаарлах фермент нь тодорхой богино нуклеотидын дарааллыг таньж, ДНХ-г зөвхөн тухайн хэсэгт нь тасалдаг уураг юм. хязгаарлалт сайт эсвэл зорилтот дараалал. Амьд бактериудад хязгаарлах ферментийн үйл ажиллагаа вирусын бактериофагуудын халдлагаас эсийг хамгаалах.

Мөн ямар хязгаарлалтын фермент хэрэглэхийг яаж мэдэх вэ? Хязгаарлалтын ферментийг сонгохдоо та дараах ферментүүдийг сонгохыг хүсч байна.

  1. Оруулгыг хажуу тийш нь тавь, гэхдээ оруулга дотроо огтолж болохгүй.
  2. Хүлээн авагчийн плазмидын хүссэн байршилд (ихэвчлэн олон клонжуулалтын газар (MCS)) байгаа боловч плазмидын өөр газар огтолж болохгүй.

Үүнээс гадна хязгаарлалтын ферментийг судалгаанд хэрхэн ашигладаг вэ?

Лабораторид, хязгаарлах ферментүүд (эсвэл хязгаарлах эндонуклеазууд ) байна ашигласан ДНХ-г жижиг хэсгүүдэд хуваах. Зүсэлтийг үргэлж тодорхой нуклеотидын дарааллаар хийдэг. Өөр хязгаарлах ферментүүд янз бүрийн ДНХ дарааллыг таньж, таслах.

Гель электрофорез ямар үүрэгтэй вэ?

Гель электрофорез Энэ нь ДНХ-ийн хэлтэрхийг хэмжээгээр нь ялгахад хэрэглэгддэг арга юм. ДНХ-ийн дээжийг а-ын нэг төгсгөлд байрлах нүхэнд (догол) ачдаг гель , мөн цахилгаан гүйдэл нь тэднийг дамжуулан татах гель . ДНХ-ийн хэсгүүд сөрөг цэнэгтэй тул эерэг электрод руу шилждэг.

Зөвлөмж болгож буй: