Цэнхэр цагаан дэлгэц хийх үед цагаан бактерийн колони агуулсан байдаг уу?
Цэнхэр цагаан дэлгэц хийх үед цагаан бактерийн колони агуулсан байдаг уу?

Видео: Цэнхэр цагаан дэлгэц хийх үед цагаан бактерийн колони агуулсан байдаг уу?

Видео: Цэнхэр цагаан дэлгэц хийх үед цагаан бактерийн колони агуулсан байдаг уу?
Видео: Хялгасан хорхой буюу цагаан хорхойны талаар 2024, Арванхоёрдугаар сар
Anonim

Харин эсрэгээр нь цагаан колони нь X-Gal-ийг метаболизмд оруулж чадахгүй хөх өнгө, учир нь тэдгээр нь оруулсан ДНХ-ийг зөөвөрлөх плазмидыг авч, lacZ α генийг тасалсны дараа функциональ β-галактозидаза үүсгэдэггүй. Эдгээр цагаан колони агуулдаг рекомбинант бактери мөн сонгох хэрэгтэй (Зураг 1).

Ийм байдлаар бүх цагаан, цэнхэр колони плазмид агуулдаг уу?

The цэнхэр колони агуулдаг "өөрийгөө" холбосон плазмидууд тэр хийх lac Z генийг тасалдаг ДНХ оруулга байхгүй. Цагаан колониуд зөөвөрлөх бактериас бүрддэг плазмид lac Z генийг тасалдуулах ДНХ оруулгатай хэсгүүдтэй. Сонголтыг ампициллин дээр хийх болно агуулсан дунд.

Үүний нэгэн адил цэнхэр цагаан скрининг хийх зорилго нь юу вэ? The хөх – цагаан дэлгэц нь a скрининг вектор дээр суурилсан молекул клончлох туршилтаар рекомбинант бактерийг хурдан бөгөөд хялбар илрүүлэх боломжийг олгодог техник. Сонирхолтой ДНХ -ийг вектор болгон холбосон болно.

Үүнийг авч үзвэл хөх цагаан колони скрининг гэж юу вэ?

The хөх - цагаан дэлгэц нь скрининг Энэ техник нь вектор дээр суурилсан генийн клончлолд амжилттай холбосон холбоосыг илрүүлэх боломжийг олгодог. Сонирхсон ДНХ нь векторт холбогддог. Хэрэв ligation амжилттай болсон бол бактерийн колони байх болно цагаан ; үгүй бол колони байх болно хөх.

Яагаад зарим колони цэнхэр, зарим нь цагаан өнгөтэй байдаг вэ?

Аливаа колони плазмид агуулсан (тиймээс ажиллаж байгаа β-галактозидазын ген) эргэдэг хөх β-галактозидазын үйл ажиллагааны үр дүн. Үүнийг α-нэмэлт гэж нэрлэдэг. Оруулга нь β-галактозидазын генийг тасалдуулсан тул эдгээр нь колони үлдэх цагаан.

Зөвлөмж болгож буй: