Видео: Sanger ДНХ-ийн дараалал хэрхэн ажилладаг вэ?
2024 Зохиолч: Stanley Ellington | [email protected]. Хамгийн сүүлд өөрчлөгдсөн: 2023-12-16 00:20
Сангерын дараалал Үүний үр дүнд 3' төгсгөлд дидеоксинуклеотидүүдээр төгссөн янз бүрийн урттай сунгалтын бүтээгдэхүүнүүд үүсдэг. Өргөтгөсөн бүтээгдэхүүнийг капилляр электрофорез эсвэл CE -ээр тусгаарлана. Молекулуудыг гель полимерээр дүүргэсэн урт шилэн капилляр руу цахилгаан гүйдэлээр шахдаг.
Ийм байдлаар ДНХ-ийн дараалал тогтоох Сэнгерийн арга юу вэ?
Аюултай дараалал , мөн гинжин хэлхээний төгсгөл гэж нэрлэдэг арга , зориулалтын техник юм ДНХ -ийн дараалал гинж төгсгөлийн дидеоксинуклеотидуудыг (ddNTPs) сонгон нэгтгэхэд үндэслэсэн. ДНХ in vitro үед полимераз ДНХ хуулбарлах. Үүнийг Фредерик боловсруулсан Сангер ба хамт олон 1977 онд.
Мөн гинжин хэлхээний төгсгөлийн дараалал хэрхэн ажилладаг вэ? Сангер ДНХ дараалал гэж бас нэрлэдэг гинж - цуцлах арга дараалал . ddNTP нь үр дүнд хүргэдэг цуцлах ddNTP-д нуклеотидуудын хооронд фосфодиэфирийн холбоо үүсэхэд шаардлагатай 3'-OH бүлэг байхгүй тул ДНХ-ийн хэлхээ. Энэ бонд байхгүй бол гинж үүсч буй нуклеотидын тоо юм дуусгавар болсон.
Зүгээр л, бид яагаад Sanger дараалал хийдэг вэ?
Аюултай дараалал нь а арга -ийн ДНХ -ийн дараалал гинж төгсгөлийн дидеоксинуклеотидын сонгомол нэгдэлд үндэслэсэн ДНХ in vitro үед полимераза ДНХ хуулбарлах. Энэ нь богино уншихаас давуу талтай хэвээр байна дараалал технологи (Illumina гэх мэт) тэр нь чадна үйлдвэрлэх ДНХ -ийн дараалал 500-аас дээш нуклеотидыг уншина.
Sanger -ийн дараалал үнэн зөв үү?
Аюултай дараалал 99.99% нарийвчлал нь клиник судалгааны “алтан стандарт” юм дараалал . Гэсэн хэдий ч шинэ NGS технологиуд нь өндөр нэвтрүүлэх чадвар, нэг дээжинд ногдох зардал багатай тул эмнэлзүйн судалгааны лабораторид түгээмэл болж байна.
Зөвлөмж болгож буй:
Төслийн менежментийн үйл ажиллагааны дараалал гэж юу вэ?
Үйл ажиллагааны дараалал. Үйл ажиллагааны дэс дараалал гэдэг нь төслийн үйл ажиллагааны хоорондын харилцааг тодорхойлж, баримтжуулах үйл явц юм. Төслийн менежментийн хувьд энэ төрлийн үйл явцын гол давуу тал нь төслийн бүх хязгаарлалтыг харгалзан хамгийн их үр ашгийг олж авахын тулд ажлын логик дарааллыг тодорхойлдог явдал юм
Хөрс үүсэх дараалал нь юу вэ?
Ерөнхийдөө эх материал, биота, газарзүйн байршил, цаг уур, цаг хугацаа нь тухайн газар нутагт ямар төрлийн хөрс үүсэхийг тодорхойлдог хөрс үүсгэгч таван хүчин зүйл юм (Женни, 1941)
Рекомбинант ДНХ-г хэрхэн тодорхойлох вэ?
Рекомбинант ДНХ (эсвэл рДНХ) нь хоёр ба түүнээс дээш эх үүсвэрийн ДНХ-г нэгтгэснээр үүсдэг. Практикт энэ үйл явц нь ихэвчлэн янз бүрийн организмын ДНХ-ийг нэгтгэдэг. Процесс нь хязгаарлалтын цэг гэж нэрлэгддэг нуклеотидын суурийн тодорхой дарааллаар тодорхойлогдсон цэгүүдэд ДНХ молекулуудыг таслах, дахин нэгдэх чадвараас хамаарна
Хязгаарлалтын ферментүүд ДНХ-г хэрхэн зохицуулдаг вэ?
Бактери нь бактериофаг буюу фаг гэж нэрлэгддэг бактерийн вирусээс хамгаалахын тулд хязгаарлах ферментийг ашигладаг. Фаг нь нянгаар халдварлахдаа ДНХ-ийг бактерийн эсэд оруулдаг бөгөөд ингэснээр хуулбарлах боломжтой. Хязгаарлалтын фермент нь фагийн ДНХ-ийг олон хэсэг болгон хуваахаас сэргийлдэг
Sanger дараалал болон дараагийн үеийн дараалал хоёрын ялгаа юу вэ?
Дараагийн үеийн дараалал (NGS) технологиуд нь ижил төстэй. Sangersequencing болон NGS-ийн гол ялгаа нь дарааллын эзлэхүүн юм. Сангерийн арга нь зөвхөн нэг ДНХ-ийн фрагментийг цаг хугацааны дарааллаар эрэмбэлдэг бол NGS нь асар их параллель бөгөөд нэг гүйлтэд сая сая фрагментуудыг нэгэн зэрэг дараалуулдаг