2025 Зохиолч: Stanley Ellington | [email protected]. Хамгийн сүүлд өөрчлөгдсөн: 2025-01-22 16:06
Бактери нь a хязгаарлах фермент бактериофаг буюу фаг гэж нэрлэгддэг бактерийн вирусээс хамгаална. Фаг нь нянгаар халдварлахдаа түүнийгээ оруулдаг ДНХ нянгийн эсэд оруулснаар түүнийг хуулбарлах боломжтой. The хязгаарлах фермент фагийн хуулбарлахаас сэргийлдэг ДНХ олон хэсэг болгон хуваасан.
Үүний тулд хязгаарлах ферментүүд ДНХ-д юу хийдэг вэ?
Хязгаарлалтын ферментүүд . Лабораторид, хязгаарлах ферментүүд (эсвэл хязгаарлах эндонуклеазууд ) зүсэхэд ашигладаг ДНХ жижиг хэсгүүдэд хуваана. Зүсэлтийг үргэлж тодорхой нуклеотидын дарааллаар хийдэг. Өөр хязгаарлах ферментүүд ялгаж таних, таслах ДНХ дараалал.
Яагаад хязгаарлах ферментүүд бактерийн ДНХ-г огтолж авдаггүй вэ? Бактери байна хязгаарлах ферментүүд , бас дууддаг хязгаарлах эндонуклеазууд , аль хайчлах давхар судалтай ДНХ тодорхой цэгүүдэд хэсгүүдэд хуваагдана. Сонирхолтой нь, хязгаарлах ферментүүд Өөрсдийгөө бүү таслаарай ДНХ . Бактери өөрсдөө урьдчилан сэргийлэх ДНХ таслахаас хязгаарлах фермент метилжүүлэх замаар хязгаарлалт сайтууд.
Нэмж дурдахад хязгаарлалтын ферментүүд ДНХ-г хэрхэн олж, тасалдаг вэ?
А хязгаарлах фермент нь ДНХ - огтлох фермент тодорхой сайтуудыг таньдаг ДНХ . Олон хязгаарлах ферментүүд үүсгэдэг ганхав бууруулах Тэдний таних цэгүүд дээр эсвэл ойролцоо, нэг судалтай давхцал бүхий төгсгөлүүдийг үйлдвэрлэдэг. Хэрвээ хоёр ДНХ молекулууд нь тохирох төгсгөлтэй байдаг бөгөөд тэдгээр нь хоорондоо нэгдэж болно фермент ДНХ ligase.
Та хязгаарлах ферментийг хэрхэн сонгох вэ?
Хязгаарлалтын ферментийг сонгохдоо та дараах ферментүүдийг сонгох хэрэгтэй
- Оруулгыг хажуу тийш нь тавь, гэхдээ оруулга дотроо огтолж болохгүй.
- Хүлээн авагчийн плазмидын хүссэн байршилд (ихэвчлэн олон клонжуулалтын сайт (MCS)) байгаа боловч плазмидын өөр газар огтолж болохгүй.
Зөвлөмж болгож буй:
Sanger ДНХ-ийн дараалал хэрхэн ажилладаг вэ?
Сэнгерийн дараалал нь 3' төгсгөлд дидеоксинуклеотидээр төгссөн янз бүрийн урттай сунгалтын бүтээгдэхүүн үүсгэдэг. Дараа нь өргөтгөлийн бүтээгдэхүүнийг капилляр электрофорез буюу CE-ээр тусгаарлана. Молекулуудыг гель полимерээр дүүргэсэн урт шилэн капилляр руу цахилгаан гүйдэлээр шахдаг
Рекомбинант ДНХ-г хэрхэн тодорхойлох вэ?
Рекомбинант ДНХ (эсвэл рДНХ) нь хоёр ба түүнээс дээш эх үүсвэрийн ДНХ-г нэгтгэснээр үүсдэг. Практикт энэ үйл явц нь ихэвчлэн янз бүрийн организмын ДНХ-ийг нэгтгэдэг. Процесс нь хязгаарлалтын цэг гэж нэрлэгддэг нуклеотидын суурийн тодорхой дарааллаар тодорхойлогдсон цэгүүдэд ДНХ молекулуудыг таслах, дахин нэгдэх чадвараас хамаарна
ПГУ-ын дидеокси ДНХ-ийн дараалалд хэрхэн үүрэг гүйцэтгэдэг вэ?
ПГУ-ын дидеокси ДНХ-ийн дараалалд хэрхэн үүрэг гүйцэтгэдэг вэ? ПГУ-ын хэрэглээ нь загвар ДНХ-ийн хамаагүй бага түвшингээс ДНХ-ийн синтезийн түвшинг илрүүлэх боломжийг олгодог. Яагаад ДНХ-ийн дараалал тогтоох явцад дидеоксинуклеотид нэгдэх нь репликацийг зогсоох үйл явдал гэж тодорхойлсон бэ?
Хязгаарлалтын ферментүүд РНХ-г таслаж чадах уу?
Хязгаарлалтын ферментүүд нь нуклеазууд юм - нуклейн хүчлийн полимеруудыг (жишээ нь ДНХ ба РНХ) зүсдэг ферментүүд. Эдгээр ферментийн ДНХ-ийг тодорхой цэгүүдэд таслах чадвар нь нянгийн дархлааны тогтолцоог бий болгодог бөгөөд энэ нь вирусээр нэвтэрсэн гадны ДНХ-г тасалж, идэвхгүй болгодог
Хязгаарлалтын өөр өөр төрлийн ферментүүд юу вэ?
Уламжлал ёсоор I, II, III, IV гэсэн дөрвөн төрлийн хязгаарлалтын ферментийг хүлээн зөвшөөрдөг бөгөөд тэдгээр нь үндсэндээ бүтэц, задралын талбай, өвөрмөц байдал, кофактороор ялгаатай байдаг