Бүрэн бус хоол боловсруулах гэж юу вэ?
Бүрэн бус хоол боловсруулах гэж юу вэ?

Видео: Бүрэн бус хоол боловсруулах гэж юу вэ?

Видео: Бүрэн бус хоол боловсруулах гэж юу вэ?
Видео: Хоол боловсруулах эрхтэн тогтолцоо хэрхэн ажилладаг вэ 2024, Арванхоёрдугаар сар
Anonim

Ан бүрэн бус хоол боловсруулах систем нь зөвхөн нэг нээлтэй байдаг. Хоол хүнс нь хог хаягдал гарч ирдэг тэр нүхээр ордог. Анус чинь амтай чинь адилхан юм шиг байх болно! Ус нэвтэрч, choanocytes хэмээх тусгай эсүүд хүнсний хэсгүүдийг шүүдэг.

Үүнийг харгалзан үзэхэд яагаад бүрэн бус хоол боловсруулалт үүсдэг вэ?

Бүрэн бус хоол боловсруулах нь хязгаарлах эндонуклеазыг хэрэглэх үед байнга тулгардаг асуудал юм. Бүрэн бус хоол боловсруулах болно тохиолдох ферментийг хэт их эсвэл хэт бага хэрэглэх үед. ДНХ-ийн дээжинд бохирдуулагч бодис байгаа нь ферментийг саатуулж, улмаар үр дүнд хүргэдэг бүрэн бус хоол боловсруулах.

Хязгаарлалтын тоймыг хэр удаан үлдээх вэ гэж хүн асууж магадгүй юм. *Pro-Tip* Хэрэглэх хугацаа болон урвал дахь ДНХ-ийн хэмжээ, инкубацийн хугацаа зэргээс хамаарна чадна 45 минутаас шөнө хүртэл. Оношлогооны хувьд боловсруулдаг , 1-2 цаг байна ихэвчлэн хангалттай. Учир нь боловсруулдаг клончлоход ашигладаг >1 мкг ДНХ-тай байна гэж зөвлөсөн чи шингээнэ дор хаяж 4 цагийн турш.

Ийм байдлаар ДНХ-ийн бүрэн боловсруулалт гэж юу вэ?

Хязгаарлалт Хоол боловсруулах огтлох үйл явц юм ДНХ молекулуудыг хязгаарлах эндонуклеаз (заримдаа хязгаарлалтын фермент эсвэл RE гэж нэрлэдэг) тусгай ферментүүдээр жижиг хэсгүүдэд хуваана.

Хоол боловсруулалтыг хэрхэн дараалан хийдэг вэ?

Протокол дараалсан ДНХ Хоол боловсруулах урвалыг инкубацлах хоол боловсруулах температур (ихэвчлэн 37 ° C) 1 цагийн турш. зогсоо хоол боловсруулах дулааныг идэвхгүйжүүлэх (65°С-т 15 минутын турш) эсвэл 10мМ эцсийн концентрацитай EDTA нэмэх замаар. Цэвэршүүлэх иж бүрдэл ашиглан ДНХ-г сэргээнэ: ДНХ-г дахин түдгэлзүүлж, 1 мкг/мкл хүртэл шингэлнэ.

Зөвлөмж болгож буй: