DdNTP-г ашиглах зорилго нь юу вэ?
DdNTP-г ашиглах зорилго нь юу вэ?

Видео: DdNTP-г ашиглах зорилго нь юу вэ?

Видео: DdNTP-г ашиглах зорилго нь юу вэ?
Видео: Все про глагол. Вид, залог, спряжение, наклонение, время, возвратность, переходность, разбор 2024, Арваннэгдүгээр
Anonim

DdNTP -д хамаарна Дидеоксинуклеотидууд ДНХ-ийн дараалалд зориулж өөр өөр урттай ДНХ-ийн хэлхээ үүсгэхийн тулд Сангер дидеокси аргад ашигладаг трифосфатууд. Үүний үр дүнд ДНХ-ийн полимержих (эсвэл ДНХ-ийн суналт) үйл явц зогсоход хүргэдэг, учир нь энэ үйл явцыг үргэлжлүүлэхийн тулд 3'-OH бүлэг шаардлагатай.

Иймээс яагаад ddNTP-ийг дараалалд ашигладаг вэ?

Дидеоксинуклеотидууд ДНХ полимеразын гинж уртасгагч дарангуйлагчид; ашигласан ДНХ-ийн Сэнгерийн аргаар дараалал . Дидеоксирибонуклеотидууд нь 3' гидроксил бүлэггүй тул энэ дидеоксинуклеотид гинжин хэлхээнд байх үед цаашид гинжин сунгалт үүсэхгүй. Энэ нь ДНХ-ийн үйл ажиллагааг зогсооход хүргэдэг дараалал.

Үүний нэгэн адил ddNTP нь dNTP-д холбогддог уу? Нэг буюу хэд хэдэн dNTPs хуулбарлах бүтээгдэхүүнийг дүрслэн харуулахын тулд цацраг идэвхт шошготой байдаг. Эцэст нь хоолой бүр дөрвөн тусгай нуклеотидын нэгийг авдаг дидеоксинуклеотидууд ( ddNTPs ). Гэсэн хэдий ч, ДНХ полимеразыг нэгтгэсний дараа гинжийг цаашид сунгаж чадахгүй, учир нь түүнд 3'-OH шаардлагатай байдаг. хавсаргах дараагийн нуклеотид руу.

Үүнтэй адилаар ddNTP нь дарааллын урвалыг хэрхэн зогсоодог вэ?

Бага хэмжээгээр агуулагдах үед урвалын дараалал , дидеоксирибонуклеозид трифосфатууд ( ddNTPs ) дуусгах дараалсан урвал өсөн нэмэгдэж буй ДНХ-ийн хэлхээнд өөр өөр байрлалд. ddNTP нь дарааллын урвалыг зогсоодог Учир нь тэдгээр нь: ДНХ полимеразыг загвар хэлхээнээс унагахад хүргэдэг. в.

Дидеоксинуклеотид агуулсан ямар техникийг ашиглаж болох вэ?

Sanger sequencing нь a арга гинжин төгсгөлийн сонгомол нэгдэл дээр суурилсан ДНХ-ийн дараалал дидеоксинуклеотидууд in vitro ДНХ-ийн хуулбарлах явцад ДНХ полимеразаар. 1977 онд Фредерик Сэнгер болон түүний хамтрагчид боловсруулсан бөгөөд энэ нь хамгийн өргөн тархсан юм. ашигласан дараалал арга ойролцоогоор 40 жилийн турш.

Зөвлөмж болгож буй: