BamHI дулааныг идэвхгүй болгож болох уу?
BamHI дулааныг идэвхгүй болгож болох уу?

Видео: BamHI дулааныг идэвхгүй болгож болох уу?

Видео: BamHI дулааныг идэвхгүй болгож болох уу?
Видео: Хэрхэн жирэмслэхгүйгээр хийх вэ? 2024, May
Anonim

Хэдийгээр NdeI чадна байх дулаан идэвхгүй болсон , BamHI -HF чадахгүй.

Ийм байдлаар та BamHI-г хэрхэн идэвхгүй болгох вэ?

Дулаан идэвхгүй болгох ердийн туршилтыг ойртуулахын тулд дараах байдлаар гүйцэтгэсэн. Тохирох NEBuffer, 0.5 мкг тугалын тимус ДНХ, 5 эсвэл 10 мкл хязгаарлагдмал эндонуклеаз (худалдааны концентрацид) агуулсан 50 мкл урвалын хольцыг 37°C-т 60 минутын турш, дараа нь 65°C эсвэл 80°C-т өсгөвөрлөнө. 20 минут.

Үүнтэй адилаар, BamHI-ийн хязгаарлалтын сайт юу вэ? BamHI . Хязгаарлалт эндонуклеаза BamH I нь өвөрмөц бус ДНХ-тэй холбогддог. BamH I (Bacillus amyloliquefaciens) нь II төрөл юм хязгаарлалт эндонуклеаз нь ДНХ-ийн богино дарааллыг (6 б.п.) таньж, тэдгээрийг зорилтот хэсэгт тусгайлан задлах чадвартай. сайт.

Үүнтэй холбогдуулан би идэвхгүйжүүлсэн хязгаарлалтын ферментийг халаах шаардлагатай юу?

Идэвхгүй болгох -ийн хязгаарлалт эндонуклеазууд ерөнхийдөө тийм биш юм шаардлагатай , гэхдээ зарим тохиолдолд энэ нь хувиргах үр ашгийг нэмэгдүүлэх боломжтой.

Дулаан идэвхгүйжүүлэх гэж юу вэ?

Дулаан - идэвхгүй болгох ( халаалт 56°С хүртэл 30 минут) хүртэл хийнэ идэвхгүй болгох комплемент, дархлааны хариу урвалын нэг хэсэг болох ийлдэст агуулагдах уургийн бүлэг. Дулаан Мөн ийлдэс дэх микоплазмыг устгахад ашигладаг.

Зөвлөмж болгож буй: