Агуулгын хүснэгт:
Видео: Плазмид генийг яаж оруулах вэ?
2024 Зохиолч: Stanley Ellington | [email protected]. Хамгийн сүүлд өөрчлөгдсөн: 2024-01-18 08:20
Үндсэн алхамууд нь:
- хайчилж нээх плазмид болон "наах" ген . Энэ үйл явц нь хязгаарлах фермент (ДНХ-г тасалдаг) ба ДНХ-ийн лигаза (ДНХ-тэй нэгддэг) дээр суурилдаг.
- Оруулах нь плазмид руу орно бактери.
- Олон өсөх плазмид -бактерийг зөөвөрлөж, уураг үйлдвэрлэх "үйлдвэр" болгон ашигладаг.
Мөн генийг плазмидын GCSE-д хэрхэн оруулах вэ?
энэ бол плазмид руу оруулна Лигазын ферментийг ашиглах. нь плазмид явдаг руу бактерийн эс. трансген нян үржиж, үр дүнд нь - д Хүний инсулин үүсгэдэг сая сая ижил бактери.
Нэмж хэлэхэд, та генийг хэрхэн дэд клон хийх вэ? Үндсэн алхамууд Дэд клонжуулалт Та эх вектороос өөрийн оруулгыг суллаж, цэвэршүүлж, энэ оруулгыг бэлтгэсэн очих вектор руу холбож, энэ холбох урвалыг чадварлаг бактерийн эс болгон хувиргана. Дараа нь та оруулахын тулд хувиргасан нүднүүдийг дэлгэцэнд хийнэ.
Үүнийг анхаарч үзвэл ген клонжуулах 4 алхам юу вэ?
Сонгодог хязгаарлалтын ферментийн задаргаа ба ligation клончлолын протоколд аливаа ДНХ-ийн фрагментийг хувилах нь үндсэндээ дөрвөн үе шатыг агуулдаг:
- сонирхсон ДНХ-ийн тусгаарлалт (эсвэл зорилтот ДНХ),
- боох,
- шилжүүлэн суулгах (эсвэл хувиргалт), болон.
- скрининг/сонголтын журам.
Плазмидыг хэрхэн өсгөх вэ?
Туршилтын журам
- ПГУ-ыг ажиллуулж, ПГУ-ын бүтээгдэхүүнийг цэвэршүүл: Оруулсан ДНХ-ээ олшруулахын тулд ПГУ-ыг ажиллуул.
- ДНХ-ээ задлах:
- Гель цэвэршүүлэх замаар оруулга болон вектороо тусгаарлана:
- Вектор дээрээ оруулгыг холбоно уу:
- Өөрчлөлт:
- Бэлэн плазмидыг тусгаарлах:
- Плазмидыг дараалалаар баталгаажуулна уу:
Зөвлөмж болгож буй:
Плазмид ДНХ-ийн тусгаарлалтад яагаад глюкоз ашигладаг вэ?
Энэ алхамын зорилго нь эсийн эхлэлийн хэмжээг нэмэгдүүлэх бөгөөд ингэснээр бэлтгэл бүрээс илүү олон плазмидын ДНХ-г тусгаарлах боломжтой болно. Эсийн гаднах осмосын даралтыг нэмэгдүүлэхийн тулд глюкоз нэмдэг. Tris нь тогтмол рН (= 8.0) байлгахад ашигладаг буферийн бодис юм
Папайя ямар генийг өөрчилдөг вэ?
Папайя цагираг вирусын (PRSV) бүрхүүлийн уургийн генийг илэрхийлдэг папайя нь 1998 онд зохицуулалтгүй болж Хавайд худалдаанд гарсан (Хүснэгт 1). PRSV нь Хавай болон дэлхий даяар папайя үйлдвэрлэлийг хязгаарлах гол хүчин зүйл юм
Плазмид оруулга гэж юу вэ?
Плазмид нь эсийн хромосомын ДНХ-ээс ялгаатай жижиг, дугуй хэлбэртэй, хоёр хэлхээтэй ДНХ молекул юм. Судлаачид ДНХ-ийн фрагмент эсвэл генийг плазмидын вектор руу оруулж, рекомбинант плазмид гэж нэрлэгддэг бодисыг үүсгэж чаддаг. Энэхүү плазмидыг хувиргах процессоор нян руу нэвтрүүлж болно
Дамжуулах плазмид гэж юу вэ?
Плазмид нь эсийн хромосомын ДНХ-ээс ялгаатай жижиг, дугуй хэлбэртэй, хоёр хэлхээтэй ДНХ молекул юм. Бактери нь коньюгаци гэж нэрлэгддэг процессоор плазмидуудыг бие биедээ шилжүүлж чаддаг
Плазмид гэж юу вэ, тэдгээрийг хэрхэн ашиглах вэ?
Плазмид нь хромосомын ДНХ-ээс бие даасан байдлаар тусгаарлагдсан эс доторх жижиг, хромосомоос гадуурх ДНХ-ийн молекул бөгөөд бие даан хуулбарлаж чаддаг. Хиймэл плазмидуудыг молекулын клончлолд вектор болгон өргөн ашигладаг бөгөөд энэ нь эзэн организм доторх рекомбинант ДНХ-ийн дарааллыг хуулбарлахад тусалдаг