Видео: Та ПГУ-ын бүтээгдэхүүний дарааллыг тогтоож чадах уу?
2024 Зохиолч: Stanley Ellington | [email protected]. Хамгийн сүүлд өөрчлөгдсөн: 2023-12-16 00:20
Шууд Дараалал -ийн ПГУ-ын бүтээгдэхүүн . Шууд хийх бүрэн боломжтой дараалал а ПГУ-ын бүтээгдэхүүн эхлээд фрагментийг хувилахгүйгээр. Шууд ПГУ-ын дараалал бусад тохиолдолд амжилтанд хүрэх нь ховор Та үүнийг баталгаажуулахын тулд хэсэг хугацаа зарцуулаарай Та орохгүй байна нэг олон хавхнаас.
Ийм байдлаар ПГУ-ын дараалал гэж юу вэ?
Шууд Дараалал -ийн ПГУ Бүтээгдэхүүн. Та бүгдийг нь устгах ёстой ПГУ бүтээгдэхүүн болохоос өмнө праймерууд болон нэгдээгүй нуклеотидууд дараалсан . Дараалал ашигласан хоёрын оронд зөвхөн нэг праймерыг ашигладаг ПГУ . Хэрэв та хоёр праймерыг арилгахгүй бол хоёрыг авах болно дараалал Унших боломжгүй бие биен дээрээ давхарласан.
Үүнтэй адилаар би ПГУ-ын праймерыг дараалалд ашиглаж болох уу? ПГУ-ын праймерууд зориулагдсан ПГУ ампликоныг олж авахын тулд олшруулалт. Праймеруудын дараалал байна ашигласан руу дараалал ДНХ-ийн хэлтэрхий ба түүний ДНХ-г илчлэх дараалал тодорхойлох. 4. Хоёр ПГУ-ын праймерууд а-д хэрэгтэй ПГУ хариу үйлдэл (ихэвчлэн); ганцхан дараалсан праймер a-д нэмэгддэг дараалал урвал.
Үүнийг анхаарч үзвэл ПГУ-ын бүтээгдэхүүнийг хэрхэн шалгах вэ?
илрүүлэх, дүн шинжилгээ хийх ПГУ-ын бүтээгдэхүүн . The бүтээгдэхүүн -ийн а ПГУ тодорхой урттай ДНХ-ийн фрагмент эсвэл хэлтэрхий байх ёстой. Олшруулсан дарааллыг илрүүлэхийн тулд олон арга техникийг ашиглаж болно (Хүснэгтийг үз). Хамгийн энгийн бөгөөд түгээмэл хэрэглэгддэг арга бол электрофорез юм ПГУ-ын бүтээгдэхүүн EtBr (этидиум бромид) бүхий агароз гель дээр.
ПГУ-ын бүтээгдэхүүнийг дараалалд оруулахын өмнө яагаад цэвэршүүлэх шаардлагатай вэ?
Цэвэршүүлэх ДНХ-ийн а ПГУ урвал нь ихэвчлэн байдаг - д шаардлагатай доод урсгалын хэрэглээ, фермент, нуклеотид, праймер болон буферийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг арилгахад тусалдаг.
Зөвлөмж болгож буй:
Урвуу транскрипцийн ПГУ-ыг юунд ашигладаг вэ?
RT-PCR (Reverse Transscriptase PCR) RT-PCR нь судалгааны лабораторид генийн илэрхийлэлийг судлах, жишээлбэл, экзоныг интроноос ялгах туршилт хийхэд ашигладаг бөгөөд удамшлын өвчнийг оношлох, эмийн эмчилгээг хянах зорилгоор эмнэлзүйн хувьд ашиглаж болно
ПГУ-ын дидеокси ДНХ-ийн дараалалд хэрхэн үүрэг гүйцэтгэдэг вэ?
ПГУ-ын дидеокси ДНХ-ийн дараалалд хэрхэн үүрэг гүйцэтгэдэг вэ? ПГУ-ын хэрэглээ нь загвар ДНХ-ийн хамаагүй бага түвшингээс ДНХ-ийн синтезийн түвшинг илрүүлэх боломжийг олгодог. Яагаад ДНХ-ийн дараалал тогтоох явцад дидеоксинуклеотид нэгдэх нь репликацийг зогсоох үйл явдал гэж тодорхойлсон бэ?
Бид яагаад Sanger дарааллыг ашигладаг вэ?
Сангерийн дараалал нь нийт дээжийн тоо бага байгаа тохиолдолд хувилбарын скрининг судалгаанд үр дүнтэй арга юм. Түүврийн тоо их байгаа хувилбарын скрининг судалгааны хувьд NGS-тэй ампликоны дараалал нь илүү үр дүнтэй бөгөөд зардал багатай байдаг
Төсөл дээрх үйл ажиллагааны дарааллыг тодорхойлох нь яагаад чухал вэ?
Үйл ажиллагааны дараалал ба сүлжээний диаграммууд. Үйл ажиллагааны дараалал нь ДБС-д байгаа бүх үйл ажиллагааг хянаж, тэдгээрийн хоорондын хамаарлыг тодорхойлох, даалгавар хоорондын бүх цаг хугацааны хамаарлыг ангилах зорилготой юм. Даалгаврын дараалал, ажил эхлэх, дуусах хугацааг хянадаг тул ажлын цаг хугацааны харилцаа чухал
ПГУ-ын бүтээгдэхүүнийг дараалалд оруулахын өмнө яагаад цэвэршүүлэх шаардлагатай вэ?
Хүссэн бүтээгдэхүүнийг баталгаажуулах нь чухал бөгөөд үүнд тусгай бус бүтээгдэхүүн, праймер димер дутагдаж байгааг батлах шаардлагатай. Урвалын хольцыг цэвэрлэх нь дараагийн урвалд саад учруулж, унших боломжгүй дараалалд хүргэж болзошгүй үл хамаарах праймер ба dNTP-ийг арилгахад шаардлагатай